• 南方医科大学解剖学教研室 广东省组织构建与检测重点实验室(广州,510515);
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目的 探讨周期性力学刺激对体外培养的成肌细胞自身抗原表达的影响。 方法 取C2C12细胞根据处理方法不同分为实验组及对照组,其中实验组分为4个亚组,即2、4、6 d周期性拉伸组(2、4、6 d拉伸组)及1 d拉伸组。2、4、6 d拉伸组:细胞置于Flexercell 5000柔性基底加载系统,以0.25 Hz拉伸频率、10%拉伸幅度进行每天2 h应力加载,连续加载2、4、6 d;1 d拉伸组:细胞置于Flexercell 5000柔性基底加载系统,以1 Hz拉伸频率、15%拉伸幅度拉伸1 h,23 h后收集细胞;对照组:细胞常规培养1、2、4、6 d。培养期间于倒置相差显微镜下观察细胞生长情况。采用流式细胞仪检测细胞增殖情况,Western blot检测自身抗原DNA依赖蛋白激酶催化亚基(Ku/the catalytic subunit of DNA-dependent protein kinase,DNA-PKcs)、Mi-2(reconfigurable components deacetylase complexes of NuRD)、U1-70(A part of ATP-dependent DNA helicaseⅡ)、组氨酰-tRNA合成酶(histidyl tRNA synthetase,HRS)表达情况。 结果 经培养后,1 d拉伸组可见脱落细胞,对照组1 d时无细胞脱落;2 d拉伸组细胞增殖较对照组2 d时明显;4 d拉伸组细胞出现分化,6 d拉伸组细胞部分融合,与对照组4、6 d时情况一致。1 d拉伸组细胞经单次拉伸后出现凋亡,相对DNA增殖指数(relative DNA proliferation index,DPI)与对照组1 d时比较,差异无统计学意义(t=0.346,P=0.747)。经周期性拉伸后,2、4 d拉伸组DPI较对照组2、4 d时显著提高(P  lt; 0.05),6 d拉伸组与对照组6 d时比较差异无统计学意义(t=1.191,P=0.303)。2 d拉伸组DNA-PKcs、Mi-2、HRS和U1-70蛋白相对表达量均较对照组2 d时明显降低(P  lt; 0.05); 4 d拉伸组与对照组4 d时比较差异均无统计学意义(P  gt; 0.05)。4 d拉伸组各抗原蛋白相对表达量均较2 d拉伸组显著增加(P  lt; 0.05),而对照组4 d 时均较2 d时显著降低(P  lt; 0.05)。 结论 短期力学刺激可以抑制成肌细胞自身抗原表达,但随时间延长,细胞分化融合以及对力学刺激的适应使其对自身抗原表达抑制作用减弱。

引用本文: 陈荣,刘幸卉,黄维一,曾慧君,史丹丹,曹标,廖华. 周期性力学刺激对成肌细胞自身抗原表达的影响. 中国修复重建外科杂志, 2013, 27(9): 1128-1133. doi: 复制

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