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找到 作者 包含"沈阳" 8条结果
  • Snail1 基因沉默对喉鳞癌 Hep-2 细胞紧密连接蛋白表达及迁移能力的影响

    本文为研究 Snail1 基因对喉鳞癌细胞株 Hep-2 紧密连接蛋白表达及迁移能力的影响,将含有 Snail1 基因的短发夹 RNA(Sh-RNA)的质粒转染喉鳞癌细胞株 Hep-2,培养出可稳定传代的 Snail1 基因沉默的细胞(命名为 Sh-snail1 细胞)。课题组以蛋白免疫印迹技术检测紧密连接蛋白 ZO-1、Occludin、Claudin-5 的表达是否发生变化。然后设计伤口愈合实验检测其迁移能力,再以蛋白免疫印迹技术检测与细胞迁移能力密切相关的 RhoGTP 酶家族重要成员 RhoA、Cdc42 蛋白的表达变化。结果表明,Sh-snail1 细胞紧密连接关键蛋白 ZO-1、Occludin、Claudin-5 表达明显上调,迁移能力明显减弱,且 RhoA、Cdc42 蛋白表达下调。该研究表明,喉鳞癌 Hep-2 细胞通过下调 Snail1 基因的表达使细胞间连接更加紧密,同时抑制 Hep-2 细胞的迁移能力,下调 RhoA、Cdc42 蛋白的表达。本文研究结果证实,Snail1 基因与 Hep-2 细胞转移过程中的细胞间紧密连接打开以及细胞迁移能力增强密切相关,为靶向治疗喉鳞癌提供分子机制的研究依据。

    发表时间:2017-08-21 04:00 导出 下载 收藏 扫码
  • 细胞骨架在自噬中的作用

    细胞自噬主要通过清除细胞中异常或多余的结构,起到维持饥饿过程中物质和能量的代谢稳定的功能,而细胞骨架调控涉及膜重排和囊泡转运等多种细胞进程。细胞自噬受到微管和肌动蛋白丝的调控:微管促进自噬体的合成,与自噬体的移动密切相关;肌动蛋白丝支撑自噬泡的扩张,促进自噬体的移动以及与溶酶体的融合;非肌性肌球蛋白ⅡA 参与调控自噬体形成初期的膜传递,肌球蛋白Ⅵ和肌球蛋白 1C 分别影响自噬体的成熟以及自噬体与溶酶体的融合。本文综述了细胞骨架系统对细胞自噬的多重调节,重点介绍肌动蛋白和肌球蛋白对自噬进程的调控,以期为研究自噬相关疾病的发病机制以及开创新的疗法提供一些新的思路。

    发表时间:2018-02-26 09:34 导出 下载 收藏 扫码
  • 基于层次分析法的某大型公立医院外科护理单元心电监护仪合理配置标准研究

    目的确定外科护理单元心电监护仪配置决策影响因素,形成科学的配置标准,为心电监护仪的合理配置提供依据。方法2018 年 5 月—6 月采用走访调研法和层次分析法确定影响某大型公立医院外科护理单元心电监护仪配置的指标及权重。结果外科护理单元心电监护仪配置影响因子为手术台次、抢救人次、急诊人次、死亡人次和重症监护病房转入转回人次,权重依次为 0.459 7、0.224 9、0.155 3、0.111 2、0.049 0,将护理单元分级作为方案层,分级制定了心电监护仪配置标准。结论基于层次分析法的外科护理单元心电监护仪配置模型实现了定性与定量分析相结合,为心电监护仪配置提供了科学合理的参考依据。

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  • 肠粘连引起肠梗阻的基因水平研究△

    目的 通过分析基因层面的差异表达,以探讨与肠梗阻相关的发病基因和治疗靶基因。方法 在基因表达公共数据库(gene expression omnibus,GEO) 中收集到10个样品的基因表达数据,其中小鼠粘连小肠组织术后1、3、7、和14d时间点的基因芯片数据共8个,小鼠正常小肠组织芯片数据2个,应用基因本体论(gene ontology,GO) 富集分析和微阵列显著性分析(significance analysis of microarray,SAM)方法,分析10个样品的基因表达情况,并对差异表达的基因进行功能注释和生物学分析。结果 肠粘连的发生伴随着大量应答刺激的基因表达上调,且这些基因产物都分布在细胞膜上。分析术后不同时间点的基因表达情况发现,Hmgcs 2基因的表达上调出现在术后3~14d,Stxbp5基因的表达上调出现在术后14d。结论 粘连的发生可能与应答刺激的基因及其分布于细胞膜上的基因产物有关,Hmgcs 2和Stxbp 5基因可能与因粘连而导致的其他并发疾病的发生有关。这为发现肠梗阻潜在的治疗靶点提供了依据。

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  • 左向右分流型先天性心脏病患儿红细胞的携氧能力研究

    目的 探讨左向右分流型先天性心脏病(congenital left to right shunts,CLRS)患儿红细胞的携氧能力及临床意义。方法 以兰州大学第二医院儿科住院确诊的CLRS患儿62例为试验组,门诊健康体检儿童40例为对照组,采用酶联免疫法(ELISA)测定其红细胞2,3-DPG的含量,同时检测其动脉血氧分压(PaO2)、动脉二氧化碳分压(PaCO2)、血液酸碱度(pH)和血氧饱和度为50%的氧分压(P50O2),并进行相关性分析。结果 试验组红细胞2,3-DPG含量(2.76±0.98 μmol/mL)高于对照组,试验组动脉血PaO2、pH、Hb含量均低于对照组,其差异均有统计学意义(Plt;0.05)。试验组中室间隔缺损患儿的2,3-DPG含量最高,其次为动脉导管未闭患儿,且各类型间差异均有统计学意义(Plt;0.05)。此外,先天性心脏病患儿红细胞2,3-DPG水平与PaO2水平存在线性关系[2,3-DPG=12.007 8 –(0.154 7×PaO2)],P50O2水平与2,3-DPG水平也存在线性关系[P50O2=26.303 6 +(1.799 2×2,3-DPG)]。结论 CLRS患儿体内存在低氧现象。红细胞2,3-DPG含量、血气分析及血红蛋白水平变化的检测对进一步了解CLRS病情转归机制,指导临床实践具有重要参考价值。

    发表时间:2016-09-07 11:00 导出 下载 收藏 扫码
  • 流体剪切力对喉鳞癌Hep2细胞形态和紧密连接的影响

    为研究流体剪切力对喉鳞癌细胞(Hep2)紧密连接的影响, 对Hep2细胞施加1.4 dyn/cm2的流体剪切力, 倒置显微镜观察不同时间点细胞的形态学变化; 透射电镜(TEM)观察剪切力加载和松弛后细胞胞间紧密连接的变化规律; Western blot检测紧密连接蛋白(Occludin、Claudin-5和ZO-1)的表达; 共聚焦显微镜下观察Claudin-5分布及表达情况。结果表明, 在流体剪切力作用下, 细胞形态由多边形呈梭形变化, 撤销力学刺激后, 细胞呈向初始形态恢复的趋势; 透射电镜观察随剪切力加载时间的增加, 细胞间连接更为紧密; Western blot结果显示剪切力诱导紧密连接蛋白Occludin、Claudin-5和ZO-1的表达增加, 而撤销剪切力后, 其表达均呈现出显著下调; 免疫荧光结果表明Claudin-5表达趋势与Western blot结果一致, 静态时Claudin-5均匀分布在胞浆, 加载剪切力后其分布易位于胞间, 撤销力学刺激后, 在胞间和胞浆区域仍有Claudin-5的表达。因此, 剪切力可改变Hep2细胞形态, 并且通过上调Occludin、Claudin-5和ZO-1蛋白增加细胞间的紧密连接。

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  • 肝癌肿瘤微环境对血管内皮细胞增殖及血管生成能力的影响

    研究间接共培养条件下肝癌细胞培养基对血管内皮细胞增殖及血管生成能力的影响, 初步探讨肿瘤微环境下血管新生的分子机制。体外培养人脐静脉内皮细胞株EA.hy926, 与肝癌细胞株HepG2条件培养基进行共培养; 四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测肝癌细胞条件培养基对血管内皮细胞增殖的影响; 血管管腔形成实验检测血管内皮细胞的血管生成能力。Western blot测定肝癌细胞条件培养基对血管内皮EA.hy926细胞血管内皮生长因子(VEGF)及其受体Flk-1表达的影响。结果表明, EA.hy926细胞经HepG2条件培养基处理后, 其增殖能力明显增加。接种于Matrigel胶的EA.hy926细胞经HepG2条件培养基刺激后, 形成管腔数目增加, 成血管能力明显增强; 同时, 其胞内VEGF及其受体Flk-1的表达呈时间依赖性上调。肿瘤微环境下肝癌细胞作用于血管内皮细胞, 可促进血管内皮细胞的增殖并提高其血管生成能力。

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  • 表面化学修饰纳米金粒子对肝癌细胞增殖和迁移的影响

    由于具有高强度的靶向性与优良的生物相容性等优势, 纳米载药颗粒已被广泛应用于癌症的诊断和治疗中。然而当纳米颗粒被癌细胞识别并内吞后, 其对癌细胞迁移行为的影响却鲜有报道。在本研究中, 我们采用自组装技术(SAMs)成功制备了具有不同化学官能团(CH3、OH、COOH和NH2)的纳米金颗粒(Au NPs), 通过透射电镜观察Au NPs在人肝癌细胞株HepG2细胞内的分布情况, 采用MTT法检测其对该细胞增殖的影响, 同时利用划痕损伤实验模型和Transwell小室模型法观察Au NPs对该细胞迁移的影响。结果显示, 不同化学官能团修饰的纳米金颗粒被细胞内吞后主要分布在囊泡边缘或胞间连接处。此外, 我们发现不同化学官能团修饰的纳米金均会对HepG2细胞的活性起到一定的抑制作用, 且随着纳米金粒子浓度的升高, 其细胞增殖能力逐渐降低。划痕模型和Transwell模型结果证实不同表面化学官能团修饰的纳米金颗粒对细胞迁移的影响均有差异, 与对照组比较, NH2-NPs、OH-NPs组显著抑制了人肝癌细胞株HepG2的迁移行为。

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