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找到 关键词 包含"端粒" 33条结果
  • 联合检测外周血hTERT mRNA及GGT mRNA-H表达对小肝癌早期诊断的价值

    目的研究hTERT mRNA 及 GGT mRNA-H 在小肝癌患者外周血中的表达,并探讨其对肝癌早期诊断的价值。方法采用RT-PCR方法检测30例小肝癌患者、18例肝炎肝硬变患者以及12例正常受试者外周血hTERT mRNA及GGT mRNAH的表达。结果小肝癌组患者hTERT mRNA及GGT mRNAH表达阳性率分别为80.0%(24/30)和46.7%(14/30),均高于AFP的检测阳性率(26.7%,8/30),Plt;0.05。正常对照组均未检测到hTERT mRNA和GGT mRNAH的表达。肝炎肝硬变组患者hTERT mRNA的表达阳性率为33.3%(6/18),未检测到GGT mRNAH的表达。 联合检测小肝癌患者hTERT mRNA及GGT mRNA-H表达的阳性率明显高于AFP的阳性率(86.7%比26.7%),Plt;0.05。结论hTERT mRNA及GGT mRNA-H在小肝癌患者中特异性表达,联合检测外周血hTERT mRNA及GGT mRNAH 可提高小肝癌的早期诊断率。

    发表时间:2016-09-08 10:46 导出 下载 收藏 扫码
  • 胃癌细胞增殖与腹腔灌洗液中端粒酶活性及腹膜转移的相关性研究

    目的研究胃癌增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达与腹腔灌洗液端粒酶活性及腹膜转移的相关性,并比较腹腔灌洗液中端粒酶活性和细胞学检测游离癌细胞预测腹膜转移的应用价值。方法应用免疫组化SP法检测60例胃癌患者胃癌组织中PCNA表达,PCRTRAPELISA法检测腹腔灌洗液中端粒酶活性,同时行腹腔灌洗液脱落细胞学(peritoneal lavage cytology,PLC)检测; 并分析其与相关临床病理因素的关系。结果胃癌患者腹腔灌洗液中端粒酶活性的阳性率为41.7%; 与浆膜侵犯、组织学类型、浸润深度、浆膜受累面积及腹膜转移密切相关,并随着浸润深度及浆膜受累面积的增加而升高(P<0.05)。PLC检测阳性率为25.0%; 在伴肉眼可见腹膜转移灶(P1~3)者明显增高,也随着浸润深度及浆膜受累面积的增加而升高。两种方法检测的阳性率总体上差异无统计学意义,但在未分化型癌、pT4、伴肉眼可见腹膜转移灶(P1~3)者端粒酶活性阳性率明显高于PLC。PCNA增殖指数(PI)在腹腔灌洗液端粒酶活性表达阳性者明显高于表达阴性者,伴肉眼可见腹膜转移灶(P1~3)者明显高于无肉眼可见腹膜转移灶(P0)者,浆膜受侵者明显高于浆膜未受侵者(P均<0.05)。结论两种方法均适用于胃癌腹腔脱落癌细胞的诊断或腹膜转移的预测,端粒酶活性检测微量癌细胞的灵敏度优于PLC法检测; 胃癌端粒酶活性与恶性增殖活性密切相关; 胃癌高增殖活性是浆膜受侵及腹膜转移的重要原因。

    发表时间:2016-08-28 04:20 导出 下载 收藏 扫码
  • 胆囊癌hTR锤头状核酶基因真核表达载体的构建

    目的 用反转录PCR法,调取胆囊癌细胞内的端粒酶RNA(hTR)基因,并针对其序列设计锤头状核酶切割基因序列,并将其构建入真核表达载体pTriEx4内。方法 根据hTR cDNA序列,设计引物,经RT-PCR法从体外培养的胆囊癌细胞内调取hTR模板区基因,根据其测序结果,合成锤头状核酶基因,与经相应酶切的真核表达载体连接,酶切鉴定重组体的正确性。结果经RT-PCR从细胞内调出68 bp序列,与hTR cDNA比较,与模板区域碱基序列一致。核酶基因重组子经酶切鉴定序列正确。结论 RT-PCR法可调出胆囊癌hTR基因有效片段; 成功构建了针对hTR模板区的核酶基因的真核表达载体,为胆囊癌的基因治疗奠定了基础。

    发表时间:2016-08-28 04:44 导出 下载 收藏 扫码
  • 检测大肠癌组织中端粒酶活性的临床意义

    目的 探讨端粒酶作为大肠癌诊断、治疗和预后参数的价值。方法应用PCR-TRAP-ELISA方法,检测大肠癌、癌旁和正常大肠粘膜组织的端粒酶活性表达。结果端粒酶在大肠癌、癌旁和正常大肠粘膜组织中表达的阳性率分别为84.8%(39/46)、20.0%(6/30)和0(0/20),大肠癌组织中端粒酶表达阳性率明显高于癌旁和正常大肠粘膜(P<0.001)。早期大肠癌(Dukes A期)即有66.7%者存在端粒酶活化。肿瘤组织学分级越低,端粒酶表达阳性率越高(P<0.05)。 结论 端粒酶可能是大肠癌恶性浸润的早期事件,可作为诊断大肠癌的一个有用的辅助指标,并有助于预测预后和指导治疗方案的选择。

    发表时间:2016-08-28 05:29 导出 下载 收藏 扫码
  • 胃肿瘤端粒酶的研究近况

    目的 介绍端粒、端粒酶的性质及其与肿瘤的关系,了解端粒、端粒酶在胃癌中的表达及意义。 方法综述国内外进展。结果 端粒酶活性在85%~90%的胃癌中可以检测到,在表达端粒酶阳性的患者比表达阴性的患者预后要差,表明端粒酶阳性的胃癌恶性程度更高。结论 胃癌端粒酶活性检测不仅可用于诊断,且可用于表示预后,未来用于抑制端粒酶的药物可以提供一种副作用较少的治疗癌症的方法。

    发表时间:2016-08-28 05:29 导出 下载 收藏 扫码
  • 甲状腺病变组织中端粒酶活性的测定及其意义

    目的 了解几种常见甲状腺病变组织中端粒酶活性的区别。方法 用端粒重复序列扩增法测定19例甲状腺癌、15例甲状腺癌癌旁组织、21例甲状腺腺瘤、17例结节性甲状腺肿及13例正常甲状腺组织端粒酶的活性。 结果 94.74%(18/19)的甲状腺癌表达出端粒酶活性,与癌旁组织(6.67%)、甲状腺腺瘤(4.67%)、结节性甲状腺肿(0%)及正常甲状腺组织(0%)比较,差异均有显著性意义(P<0.0001)。结论 端粒酶是甲状腺癌定性的良好标志物,且在甲状腺病变的鉴别诊断中具有重要意义。

    发表时间:2016-08-28 05:30 导出 下载 收藏 扫码
  • 体外扩增过程中CD34+细胞内B细胞特异单克隆鼠白血病毒整合位点基因1和人端粒酶逆转录酶基因的表达

    目的 研究体外扩增过程中,CD34+细胞内B细胞特异单克隆鼠白血病毒整合位点基因1(B-cell-specific monoclonal leukemia virus insert site 1,Bmi1)和人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)基因的表达水平与其扩增特性的相关性。 方法采用含FBS、干细胞生长因子、Flt-3配体和促血小板生成素的IMDM培养基体外培养脐血CD34+细胞,在28 d培养过程中检测CD34+细胞扩增倍数、CD34+细胞比生长速率以及集落形成率的变化趋势,并采用荧光定量PCR检测体外扩增过程中CD34+细胞内Bmi1和hTERT基因表达水平变化,分析以上基因表达水平与CD34+细胞扩增特性之间的关系。 结果经过28 d的体外培养,CD34+细胞共扩增了(20.1 ± 3.5)倍,其占扩增后总细胞的比例由培养前的95.5% ± 2.6%下降至2.1% ± 0.4%;CD34+细胞的比生长速率和集落形成率均在培养7 d后出现明显下降,而细胞内Bmi1和hTERT mRNA的表达水平在培养7 d时达最高,此后逐渐下降至培养前水平。 结论Bmi1和hTERT基因表达与CD34+细胞体外增殖能力可能存在一定相关性。

    发表时间:2016-08-31 05:39 导出 下载 收藏 扫码
  • 新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后细胞凋亡与端粒酶逆转录酶的表达

    目的 探讨缺氧缺血性脑损伤(hypoxia ischemia brain damage,HIBD)时端粒酶逆转录酶(telomerase reverse transcriptase,TERT)的表达及神经元凋亡情况。 方法 42 只清洁级7 日龄SD 大鼠,雌雄不限,体重12 ~ 18 g,随机分为假手术组(6 只)和缺氧缺血组(36 只)。缺氧缺血组实验动物分离右侧颈总动脉,双线结扎,缝合皮下组织及皮肤,并低氧处理,制备HIBD 动物模型;假手术组仅将缝线从右侧颈总动脉下穿过,不结扎,缝合切口,不作低氧处理。分别于术后4、8、12、24、48 及72 h 处死大鼠取脑组织,采用免疫组织化学法检测TERT 和CC3 蛋白表达,采用TUNEL 染色检测细胞凋亡。 结果 缺氧缺血组TERT 蛋白表达于术后4 h 开始增加,24 ~ 48 h 达高峰,之后略有下降;CC3 蛋白表达于术后4 h 开始增加,24 h 明显升高,48 h 及72 h 维持较高水平。假手术组TERT 和CC3 仅有少量弱阳性表达。缺氧缺血组术后各时间点TERT 及CC3 蛋白表达与假手术组比较,差异均有统计学意义(P lt; 0.05)。TUNEL 染色显示,缺氧缺血组术后4 ~ 8 h 神经细胞凋亡开始增多,24 ~ 48 h 达高峰,72 h 仍维持在较高水平;假手术组偶见阳性细胞。缺氧缺血组术后各时间点阳性细胞计数与假手术组比较,差异均有统计学意义(P lt; 0.05)。 结论 缺氧缺血能诱导脑组织中TERT 表达增加,TERT 可能对神经细胞凋亡起一定保护作用。

    发表时间:2016-08-31 05:48 导出 下载 收藏 扫码
  • 端粒酶逆转录酶在神经系统疾病修复中的研究进展

    目的 探讨端粒酶逆转录酶(telomerase reverse transcriptase,TERT)在神经系统疾病修复中的研究进展。 方法 广泛查阅TERT 与各种神经系统疾病修复的相关文献并进行综合分析。 结果 TERT 是端粒酶的重要组成成分,也是其活性的关键调节因子,它在神经系统肿瘤、神经发育缺陷及神经损伤等各种神经系统疾病的病理机制中发挥关键作用,已逐渐成为神经系统疾病修复治疗的研究热点。 结论 TERT 在神经系统疾病的修复治疗中具有重要意义和应用前景,需进一步研究。

    发表时间:2016-08-31 05:49 导出 下载 收藏 扫码
  • 大鼠端粒酶逆转录酶转染星形胶质细胞培养液对缺氧缺血神经元的保护作用

    目的 端粒酶逆转录酶(telomerase reverse transcriptase,TERT)是决定细胞生长与寿命的关键因素,也与细胞抵制应激和减少凋亡密切相关。通过构建脑神经元体外缺氧缺血再灌注(hypoxia-ischemia-reperfusion,HI-RP)模型,探讨大鼠TERT 转染星形胶质细胞(astrocytes,AS)的培养液对HI 损伤神经元的影响。 方法 构建大鼠全长TERT 表达质粒pcDNA3-TERT。取20 只新生3 d SD 大鼠处死后取大脑皮层,分离培养AS,通过脂质体介导用pcDNA3-TERT 及pcDNA3 转染AS,作为pcDNA3-TERT 转染组及pcDNA3 转染组,以未转染质粒的AS(未转染组)作为对照。免疫细胞化学染色检测各组AS 特异性标志物胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)及目的基因TERT的表达。分别收集pcDNA3-TERT 转染组、pcDNA3 转染组、未转染组的AS 条件培养液(astrocyte conditioned medium,ACM),分别为TERT-ACM、p-ACM 及ACM。取60 只新生当天SD 大鼠,处死后取大脑皮层进行神经元原代培养,取培养8 ~ 9 d 的大鼠神经元随机分为对照组、ACM 组、p-ACM 组、TERT-ACM 组及正常组。前4 组分别于无血清DMEM培养基及含ACM、p-ACM、TERT-ACM 的无血清DMEM 培养基中进行HI 培养3 h 后,再体外模拟RP 3、6、18、24、36 h;正常组神经元不作处理。采用MTT 法测定神经元存活率、比色法测定神经元培养液中乳酸脱氧酶(loctate dehydrogenase,LDH)活性、TUNEL 法检测神经元凋亡情况。 结果 免疫细胞化学染色示,未转染组、pcDNA3-TERT 转染组及pcDNA3 转染组的GFAP 阳性细胞百分率分别为98%、99%、98%;未转染组与pcDNA3 组未见TERT 表达,pcDNA3-TERT 转染组TERT 阳性细胞百分率达98%。MTT 检测显示,对照组、ACM 组、p-ACM 组及TERT-ACM 组神经元存活率均较正常组降低,其LDH 活性及TUNEL 检测凋亡指数均较正常组增高,差异均有统计学意义(P lt; 0.05)。ACM 组、p-ACM 组与对照组比较,在HI 3 h 及RP 3 h 神经元存活率均增高,LDH 活性及凋亡指数均降低,差异有统计学意义(P lt; 0.05);但之后各时间点各项指标差异无统计学意义(P gt; 0.05)。各时间点TERT-ACM 组与对照组、ACM 组和p-ACM 组比较,神经元存活率均增高,LDH 活性及凋亡指数均降低,差异有统计学意义(P lt; 0.05);各时间点p-ACM 组与ACM 组各项指标比较,差异均无统计学意义(P gt; 0.05)。 结论 经质粒pcDNA3-TERT 转染AS 培养液处理的大鼠神经元对HI 损伤有更强的耐受性,转染AS 培养液可能对HI 神经元具有保护作用。

    发表时间:2016-09-01 09:03 导出 下载 收藏 扫码
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