华西医学期刊出版社
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找到 关键词 包含"脊髓损伤" 134条结果
  • 无脊髓损伤下颈椎骨折的手术疗效分析

    目的 评价颈椎前路融合手术治疗无脊髓损伤下颈椎骨折的疗效。 方法 2009年10月-2010年6月,采用经前路颈椎单间隙或椎体次全切椎管减压椎间植骨融合治疗无脊髓损伤下颈椎骨折。共12例患者,男10例,女2例;年龄19~55岁,平均33.5岁。12例患者中术前神经功能均为脊髓损伤分级E级,以颈部疼痛、颈椎活动障碍等局部症状为主。所有患者术前常规行X线片及CT、MRI检查。并与正常人的数据进行比较。 结果 患者术前颈3-7骨性椎管矢状径及Pavlov比值均较正常值大。手术时间35~105 min,平均65 min;术中出血20~100 mL,平均30 mL。所有患者无术中相关并发症发生,12例患者均获得随访,术后颈椎椎间高度随访过程中未见明显丢失,植骨融合良好,未见颈椎不稳及脊髓神经损伤加重表现。 结论 颈椎前路融合手术治疗无脊髓损伤下颈椎骨折恢复快,疗效满意,手术相关并发症少。

    发表时间:2016-08-26 02:09 导出 下载 收藏 扫码
  • 脊髓损伤所致神经源性膀胱患者排尿方式改变的自我护理

    【摘要】 目的 总结脊髓损伤所致神经源性膀胱患者,在排尿方式改变后自我护理的方法与经验。 方法 2008年7月-2010年1月,通过制定个体化健康宣教计划、规律性饮水排尿方法、熟练的清洁间歇性导尿技术,指导和帮助患者掌握和进行自我排尿管理。 结果 21例患者采用清洁间歇性导尿术,无一例出现严重的泌尿系感染、泌尿系结石、膀胱憩室、输尿管扩张、肾积水等泌尿系统的其它并发症。 结论 掌握正确的清洁间歇性导尿术自我护理方法,对维持患者的膀胱、尿道的正常生理功能,预防泌尿系统其它并发症,提高患者的生活质量,延长生命有重要意义。

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  • 硫酸软骨素酶ABC对大鼠脊髓损伤后轴突髓鞘化和胶质瘢痕的影响

    目的探讨硫酸软骨素酶ABC(chondroitinase ABC,ChABC)对大鼠脊髓损伤后轴突再生、髓鞘化和胶质瘢痕形成的影响。 方法将72只雄性SD大鼠随机分为ChABC治疗组(A组)、生理盐水治疗组(B组)和假手术组(C组),每组24只。A、B组采用改良Allen撞击法制作大鼠T9中度脊髓损伤模型,分别在伤后1 h和之后连续7 d每天1次经蛛网膜下腔注射6 μL浓度为1 U/mL ChABC和生理盐水;C组仅打开椎管,不损伤脊髓。术后1、7、14、28 d,采用BBB评分评定大鼠后肢运动功能恢复情况;取出损伤段脊髓组织,行HE染色和Nissl染色,并采用免疫组织化学染色检测髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)、生长相关蛋白43(growth associated protein 43,GAP-43)和胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)的变化情况。 结果术后各时间点C组BBB评分均明显高于A、B组(P lt; 0.05);术后随时间延长A、B组BBB评分逐渐增加,14、28 d时A组BBB评分明显优于B组(P lt; 0.05)。HE和Nissl染色显示术后各时间点A组脊髓组织形态和神经元数量均优于B组。术后各时间点A、B组MBP和GAP-43的积分吸光度(IA)值及GFAP染色阳性面积均高于C组(P lt; 0.05),术后7、14、28 d时A组MBP和GAP-43的IA值明显高于B组(P lt; 0.05),GFAP染色阳性面积明显小于B组(P lt; 0.05)。 结论ChABC能有效改善大鼠脊髓损伤区域微环境,提高MBP和GAP-43表达并抑制GFAP表达,促进轴突再生与髓鞘化,抑制胶质瘢痕形成,促进神经功能恢复。

    发表时间:2016-08-31 04:06 导出 下载 收藏 扫码
  • NEP1-40基因修饰对神经干细胞移植后存活和分化的影响

    目的 探讨NEP1-40(Nogo extracellular peptide residues 1-40)基因修饰对神经干细胞(neural stem cells,NSCs)移植后存活和分化的影响。 方法 从孕18 d Wistar大鼠胚胎大脑皮质中分离获得原代NSCs并进行体外培养。采用慢病毒载体将NEP1-40基因导入第3代NSCs内完成NEP1-40基因修饰。将30只成年雌性SD大鼠在T9水平进行脊髓右侧半切后随机分为脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)组(B组)、NSCs移植组(C组)、NEP1-40基因修饰NSCs组(D组),每组各10只,伤后7 d在损伤局部分别植入NSCs基础培养基、NSCs悬液及NEP1-40基因修饰的NSCs;另取10只SD大鼠仅行T9椎板切除设为假手术组(A组)。移植后8周,取损伤段脊髓组织行辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)神经示踪、巢蛋白(Nestin)免疫荧光染色及神经丝蛋白200(neurofilament 200,NF-200)、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic portein,GFAP)、髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)免疫组织化学染色,评价神经纤维再生情况及移植细胞存活和分化情况。 结果 移植后8周,A、B、C、D组HRP阳性染色神经纤维束分别为(85.17 ± 6.97)、(12.17 ± 2.79)、(33.58 ± 5.47)、(59.25 ± 7.75)个,B、C、D组显著少于A组(P lt; 0.01);但C、D组显著高于B组,D组显著高于C组,差异均有统计学意义(P lt; 0.01)。Nestin免疫荧光染色示,A组未见明显Nestin荧光信号,B组仅可见少量散在荧光信号,C、D组有较强荧光信号。免疫组织化学染色定量分析示,NF-200阳性细胞数及MBP积分吸光度(IA)值A组最高,D组次之,C组较少,B组最少,组间两两比较差异均有统计学意义(P lt; 0.05);GFAP阳性细胞数B组最多,D组次之,C组较少,A组最少,组间两两比较差异均有统计学意义(P lt; 0.05);C、D组间NF-200、GFAP、MBP阳性细胞百分比比较差异均无统计学意义(P gt; 0.05)。 结论 NEP1-40基因修饰对NSCs移植后的分化无明显诱导性,但能促进移植细胞存活、分化及神经元轴突再生,为研究NSCs移植治疗SCI提供了新思路。

    发表时间:2016-08-31 04:05 导出 下载 收藏 扫码
  • 姜黄素对大鼠脊髓损伤后降钙素基因相关肽表达的影响

    目的探讨姜黄素对大鼠脊髓损伤后神经细胞降钙素基因相关肽(calcitionin gene related peptide,CGRP)表达的影响。 方法成年雌性SD大鼠200只,体重250~300 g,随机分为4组(n=50),分别为假手术组、生理盐水组、姜黄素低剂量治疗组(低剂量组)和姜黄素高剂量治疗组(高剂量组)。假手术组仅咬除椎板,暴露脊髓;生理盐水组、低剂量组及高剂量组制备脊髓损伤模型。术后即刻低剂量组及高剂量组分别按照30、100 mg/kg剂量腹腔注射姜黄素,生理盐水组按照30 mg/kg剂量腹腔注射生理盐水;之后每天注射1次,共7 d。假手术组不作处理。术后1、3、7、14、21 d进行斜板实验与BBB评分,评价大鼠运动功能恢复情况;取脊髓组织行免疫组织化学染色及Western blot检测,观察CGRP表达变化。结果各时间点生理盐水组、低剂量组及高剂量组BBB 及斜板实验评分均显著低于假手术组(P lt; 0.05)。BBB评分:术后3、7、14、21 d,高、低剂量组均显著高于生理盐水组(P lt; 0.05),术后7、14、21 d高剂量组显著高于低剂量组(P lt; 0.05)。斜板实验评分:术后7、14、21 d,高、低剂量组均显著高于生理盐水组,高剂量组显著高于低剂量组(P lt; 0.05)。免疫组织化学染色示,各时间点假手术组CGRP阳性细胞数均显著高于其他3组,高剂量组显著高于低剂量组(P lt; 0.05);术后3、7、14、21 d,高、低剂量组均显著高于生理盐水组(P lt; 0.05)。假手术组各时间点均有CGRP蛋白表达。随时间延长,生理盐水组CGRP蛋白表达逐渐降低;高、低剂量组表达逐渐升高,14 d时达峰值,之后维持较高水平表达。 结论大鼠脊髓损伤后用30 mg/kg姜黄素治疗即可改善运动功能,100 mg/kg剂量效果更明显,特别是促进CGRP大量表达,可能是其对神经系统的保护机制之一。

    发表时间:2016-08-31 04:05 导出 下载 收藏 扫码
  • 17β-雌二醇对去势大鼠慢性脊髓损伤后神经保护作用的实验研究

    目的探讨17β-雌二醇对去势大鼠慢性脊髓损伤后神经细胞凋亡的影响。 方法取90只雌性Wistar大鼠,体重220~250 g,行双侧卵巢切除术;2周后将大鼠随机分为3组(n=30):假手术组(A组),慢性渐进性压迫性脊髓损伤加17β-雌二醇组(B组)、慢性渐进性压迫性脊髓损伤空白对照组(C组)。A组仅手术切除T10棘突;B、C组制备慢性渐进性压迫性脊髓损伤模型后,分别于造模后每周腹腔注射17β-雌二醇2次(每次100 μg/kg)和相同剂量生理盐水。于造模后1、3、7、14、28、60 d采用改良Tarlov评分及斜板实验评分观察大鼠运动功能情况,取材后行HE染色、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)免疫组织化学染色及TUNEL染色观察。 结果造模后14、28及60 d,B组改良Tarlov评分及斜板实验评分均优于C组,但低于A组,差异有统计学意义(P lt; 0.05)。HE染色示,造模28 d B组镜下见脊髓灰质轻度水肿、神经元肿胀,有少量胶质细胞和星形胶质细胞增生,病理改变较C组减轻;60 d B组脊髓灰质轻度水肿、神经元肿胀均明显减轻。造模后14、28、60 d B组Caspase-3阳性细胞百分率显著低于C组,7、14、28、60 d B组细胞凋亡率显著低于C组,但均高于A组,差异均有统计学意义(P lt; 0.05)。 结论17β-雌二醇能减少大鼠慢性脊髓损伤后神经细胞凋亡,促进神经功能恢复。

    发表时间:2016-08-31 04:07 导出 下载 收藏 扫码
  • 大鼠脊髓损伤减压后神经功能恢复与Fas表达的相关性研究

    目的通过环扎法制备大鼠急性脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)模型,研究不同时间点减压后细胞凋亡基因Fas的表达规律及与神经功能恢复的关系。 方法13周龄雄性SD大鼠100只,体重255~376 g,随机分为4组,每组25只。A组为对照组,仅行椎板切除;B、C、D组均采用环扎法建立急性SCI模型,B、C组分别于术后8、72 h行脊髓减压,D组术后不行脊髓减压。于术后1、3、7、14、21 d采用BBB评分及斜板实验评分评价神经功能恢复情况;处死动物取材行HE染色、免疫组织化学染色观察Fas表达,TUNEL标记观察细胞凋亡水平。 结果A组术后各时间点BBB评分和斜板实验评分均明显优于B、C、D组,3、7、14、21 d时B组优于C、D组,C组优于D组,差异均有统计学意义(P lt; 0.05)。A组各时间点脊髓组织结构及形态清楚,未见出血、水肿和变性坏死的神经元。术后1 d,B、C、D组脊髓组织明显出血、水肿,可见神经元死亡,D组较显著;3、7 d,B组细胞变性较C、D组轻;14、21 d,B组损伤区可见较少胶质细胞,有纤维母细胞增生和修复现象,C、D组脊髓内有部分坏死、囊腔及空洞形成。A组术后各时间点均少见Fas和TUNEL阳性细胞;B、C、D组术后各时间点均见Fas和TUNEL阳性细胞,3 d达峰值,7 d 表达减弱,21 d仍有表达;其中D组阳性细胞数最多,B组少于C、D组,差异均有统计学意义(P lt; 0.05)。 结论SCI后早期减压有利于大鼠神经功能的恢复, Fas信号通道可能在诱导SCI后神经细胞凋亡的过程中发挥重要作用。

    发表时间:2016-08-31 04:07 导出 下载 收藏 扫码
  • 硫酸软骨素酶ABC联合BMSCs修复大鼠脊髓损伤的实验研究

    目的探讨硫酸软骨素酶ABC(chondroitinase ABC,ChABC)联合BMSCs对大鼠脊髓损伤的修复作用。 方法取新生SD大鼠股骨、胫骨骨髓分离培养原代BMSCs。取成年雄性SD大鼠24只,体重200~230 g,制备脊髓挤压伤模型后,随机分为脊髓损伤对照组(A组)、BMSCs移植组(B组)、ChABC注射组(C组)和ChABC联合BMSCs移植组(D组),每组6只。伤后7、14 d采用BBB评分法评价大鼠后肢运动功能;伤后14 d取材行HE染色计算损伤区面积;采用免疫荧光染色法观察胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)/硫酸软骨素蛋白多糖(chondroitin sulfate proteoglycan,CSPG)和GFAP/ 生长相关蛋白43(growth associated protein 43,GAP43)双标表达情况。 结果伤后7 d各组大鼠均恢复了后肢3个关节的运动,各组BBB评分比较差异无统计学意义(P gt; 0.05);伤后14 d A、B、C组大鼠后肢3个关节无负重拖动,D组大鼠足底位于负重位或偶尔足背负重步行,D组BBB评分高于其余3组(P lt; 0.05)。伤后14 d HE染色示,各组损伤区形成空洞,空腔内及其周边存在大量巨噬细胞,空洞周围被瘢痕组织包裹;D组损伤区面积显著小于其余3组(P lt; 0.05)。伤后14 d,GFAP/CSPG双重免疫染色示D组星形胶质细胞瘢痕损伤区明显减少,未见空洞形成;相对于A组的荧光强度值结果显示,C、D组显著低于B组(P lt; 0.05)。GFAP/GAP43双重免疫染色示D组GAP43免疫组织化学染色阳性纤维穿过损伤区;相对于A组的荧光强度值结果显示,D组显著高于B、C组(P lt; 0.05)。 结论采用ChABC早期抑制星形胶质细胞分泌CSPG,并联合BMSCs移植可促进神经纤维再生,对大鼠脊髓损伤有一定修复作用。

    发表时间:2016-08-31 04:07 导出 下载 收藏 扫码
  • BMSCs联合去细胞肌肉生物支架修复大鼠脊髓半切损伤的实验研究

    目的 以去细胞肌肉生物支架(acellular muscle bioscaffolds,AMBS)接种BMSCs,同种异体移植修复大鼠脊髓半切损伤,观察两者联合移植对脊髓损伤的修复作用。 方法取8周龄雌性SD大鼠,采用改良化学方法制备AMBS,并进行复合冷灭菌;密度梯度离心法提取、贴壁法培养BMSCs,取第3代细胞用Hoechst 33342荧光标记,采用注射法制备BMSCs-AMBS复合支架,14 d后扫描电镜及荧光显微镜观察其生物相容性。取成年雌性SD大鼠48只,制备T9~11脊髓半切损伤模型后随机分为4组(n=12),A组于缺损处移植BMSCs-AMBS复合支架,B组单独移植BMSCs,C组单独移植AMBS,D组注射PBS作为空白对照组,分别于术后1、2、3、4周行运动功能评分,术后4周行HE染色观察及免疫荧光检测。 结果Masson染色及HE染色示AMBS内部呈平行结构,主要为胶原纤维,几乎无肌纤维。BMSCs-AMBS复合培养14 d后荧光显微镜观察示Hoechst 33342标记BMSCs大量存活,扫描电镜可见BMSCs贴附于支架内表面生长。术后2~4周,大鼠BBB评分A组均高于其余3组(P lt; 0.05),D组明显低于其余3组(P lt; 0.05);术后4周B组明显高于C组(t=10.352,P=0.000)。术后4周,HE染色示脊髓空洞面积A组明显小于其余3组,免疫荧光染色示A 组神经丝蛋白200、巢蛋白阳性细胞表达量高于其余3组,神经胶质原酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)则明显低表达。A、B组荧光示踪的BMSCs移植到体内后主要迁移至对侧灰质前角,部分分化为神经元样细胞。A、B、C、D组GFAP荧光半定量分析积分吸光度(IA)值分别为733.01 ± 202.04、926.42 ± 59.46、1 069.37 ± 33.42、1 469.46 ± 160.53,A组明显低于其余3组,D组高于其余3组,差异均有统计学意义(P lt; 0.05)。 结论AMBS具有相对规则的内部结构,与BMSCs有良好生物相容性,能抑制胶质瘢痕,促进BMSCs存活、迁徙、分化,是细胞移植理想的天然载体。两者联合移植修复大鼠脊髓损伤能发挥协同作用,促进运动功能恢复。

    发表时间:2016-08-31 04:22 导出 下载 收藏 扫码
  • 神经生长因子β 腺相关病毒穿梭质粒的构建和鉴定

    【摘 要】 目的 构建能够表达神经生长因子β( nerve growth factor β,NGF-β)的重组腺相关病毒(adenoassociatedvirus,AAV)穿梭质粒,为进一步包装AAV 奠定基础。 方法 利用高保真酶分别扩增pAAV- 多克隆位点(multiple cloning site,MCS)的结构元件和pGenesil-1.1 的功能元件,连入T-easy 载体,限制性核酸内切酶酶切并回收目的片段,DNA 连接酶连接,得到含U6 和CMV 双启动子的重组AAV 穿梭质粒pAAV-U6/CMV- 增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP),用该质粒转染293 细胞,观察有无绿色荧光表达;培养人Miapaca-2 细胞,提取总RNA,进行RT-PCR 得到NGF-β 基因,插入T-easy 载体,得到T-easy-NGF-β;将NGF-β 插入pAAV-U6/CMV-EGFP,构建NGF-β 重组AAV 穿梭质粒pAAV-U6/CMV-NGF-β,将该质粒送基因测序。 结果 双酶切pAAV-U6/CMV-EGFP可见4 250、800 bp 条带,质粒转染293 细胞后可见绿色荧光表达;质粒T-easy-NGF-β 双酶切可见3 015、736 bp 条带,测序显示基因序列正确;双酶切pAAV-U6/CMV-NGF-β 可见4 250、736 bp 条带;质粒pAAV-U6/CMV-NGF-β 测序显示载体中的基因序列正确。 结论 成功构建NGF-β 重组AAV 穿梭质粒,为进一步深入研究脊髓损伤的基因治疗提供了实验基础。

    发表时间:2016-08-31 04:22 导出 下载 收藏 扫码
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